Zasada działania pipety opiera się głównie na ruchu tłoka oraz powstawaniu próżni lub ciśnienia. Pipety mogą być podzielone na dwie kategorie: systemy tłoka gazowego i zewnętrzne systemy tłokowe. Oto szczegółowe wprowadzenie:
1. System tłoka gazowego. Ten typ systemu zawiera powietrze wewnątrz, a gdy przycisk kontrolny jest naciśnięty, tłok wydusza część powietrza z kropelki, tworząc próżni w głowicy ssącej, która wchłania ciecz. Po zwolnieniu przycisku, część próżni jest wypełniona cieczą, która została wchłonięta do głowicy ssącej i następnie wyduszana przez pchnięcie tłoka w dół. Zewnętrzny system tłoka. Tłok w tym systemie bezpośrednio styka się z docelową cieczą. Gdy tłok jest ciągnięty w górę, ciśnienie atmosferyczne wciska ciecz do głowicy ssącej.
Ponadto, pojemność kropelki może być ustawiona poprzez dostosowanie gałki sterującej objętością kropelki. Dokładność kropelki zależy również od jej konstrukcji, takiej jak sprężystość sprężyny, która określa zdolności ssania i wyduszania kropelki.